ساخت کیت‌های تشخیصی ویروس آنفلوآنزای طیور در دانشگاه تهران

پژوهشگران دانشگاه تهران با استفاده از نانوذرات طلا موفق به تولید کیت تشخیصی شدند که توانایی‌شناسایی طیورآلوده ‏به ویروس آنفلوآنزا را دارد.

پژوهشگران دانشگاه تهران با استفاده از نانوذرات طلا موفق به تولید کیت تشخیصی شدند که توانایی‌شناسایی طیورآلوده ‏به ویروس آنفلوآنزا را دارد. نتایج این طرح در دامپزشکی، جهت تشخیص بیماری و تفکیک طیورآلوده به ویروس آنفلوآنزا از طیور ‏واکسینه شده کاربرد دارد.‏

یکی از مشکلات در صنعت دامپزشکی تفکیک طیور آلوده از واکسینه است و بر این اساس تست‌هایی را تحت عنوان ‏DIVA‏ طراحی می‌کنند تا بتوان حیوان یا طیور آلوده را از واکسینه تفکیک نمایند و کیت طراحی شده این توانایی را دارد.‏

در این کار برای تشخیص آنفلوآنزای پرندگان از پپتید ایمونودومیننت پروتئین ‏NS1‎‏ ویروس آنفلوآنزا جهت تشخیص استفاده ‏شد. این پپتید به علت سایز کوچکی که دارد در تست وسترن بلات قابل استفاده نیست. زیرا با اعمال ولتاژ این پپتید دیفیوز ‏می‌شود. در این تحقیق با استفاده از فناوری نانو از نانوذرات طلا استفاده شد تا پپتید در سطح کاغذ مخصوص تست وسترن ‏بلات نگه داشته شود.

نانوذرات طلا با گروه‌های عاملی اسیدهای آمینه موجود در پپتید باند می‌شوند و مانع از دیفیوز شدن آن ‏حین عمل وسترن بلات می‌گردند و بدین ترتیب در مراحل بعد می‌توان سرم‌های مشکوک را با این آنتی ژن ارزیابی نمود و ‏آلودگی را تشخیص داد.‏

تارا امامی دانشجوی دکترای فناوری نانو پزشکی دانشگاه تهران، که پایان نامه کارشناسی ارشد خود را در این زمینه انجام ‏داده است در مورد نحوه انجام این تحقیقات گفت: «ابتدا نمونه‌های سرمی آلوده و واکسینه طیور جمع آوری شد و پپتید مورد ‏نظر به‌وسیله‌ی شرکت آلمانی سنتز شد. نانوذراتی که استفاده شد هم به‌صورت تجاری و هم در آزمایشگاه جهت مقایسه ‏خریداری و سنتز شدند. ابتدا با تکنیک ‏Tricine SDS PAGE‏ پپتید روی ژل برده شد پپتید به علت سایز کوچکی که دارد در ‏شرایط خاص باید الکتروفورز شود سپس کاغذهای ‏PVDF‏ که برای وسترن بلات به‌کار می‌روند با نانوذرات طلا آغشته شد و ‏سپس پپتید از روی ژل به کاغذ منتقل شد، در مرحله بعد سرم‌ها با این کاغذها که حاوی آنتی ژن پپتید هستند انکوبه شدند و ‏آنتی بادی موجود در سرم با آنتی ژن واکنش داده و با هم باند می‌شوند. پس از اضافه کردن آنتی بادی ثانویه حاوی آنزیم ‏پراکسیداز، این آنتی بادی در صورت اتصال آنتی بادی اولیه با آن واکنش داده و در مرحله آخر با اضافه نمودن سوبسترای کمی ‏لومینسانس در دستگاه ‏Gel Doc‏ باند حاصل از واکنش را مشاهده می‌کنیم.»‏

نتایج این طرح در دامپزشکی، جهت تشخیص بیماری و تفکیک طیور طیورآلوده به ویروس آنفلونزا کاربرد دارد. ‏مقاله این کار تحقیقاتی که به دست تارا امامی و همکاران وی صورت گرفته است، در مجله
‏ ‏the journal of applied poultry research‏ (جلد ۲۱، شماره ۳، سپتامبر ۲۰۱۲) منتشر شده است. علاقمندان می‌توانند ‏متن کامل مقاله را در صفحات ۵۶۳ الی ۵۶۶ همین شماره مشاهده نمایند.‏